Miercoles 18 diciembre
El pasado
Martes 17 de diciembre nos vimos las caras a través de pantallas del ordenador
para discutir los resultados de nuestros extendidos y plantear los próximos pasos
en nuestra investigación.
Foto de pantallazos de reunión…
Las
conjugaciones salieron de libro, os recuerdo, para cada mezcla de bacterias a
conjugar se puso a su vez un control negativo en el que la bacteria que hacia
de puente (prK2013) entre la donadora del DNA y la aceptora no se añadía.
Así, en nuestros extendidos solo afloraron colonias aisladas (conjugantes positivos) en aquellas mezclas donde estaban las tres bacterias participantes (ver la siguiente imagen a modo de ejemplo
Sólo en la 5
aparecen colonias asiladas y no en las dos réplicas de la placa 6 donde no se
añadió la bacteria helper (pRK2013).
Igual sucedió con los demás constructos, ver documento conjugaciones en
recursos.
Así pues, ya
tenemos el material de partida para probar el efecto de las mutaciones en el
locus UG5 sobre la resistencia a fagos en S.
melloti.
Pero, en qué
consisten esas mutaciones.
Son cambios
puntuales en la proteína que codifica el gen UG5
Uno de ellos
consiste en sustituir dos aspárticos (dd) a alaninas (aa). Este cambio está
descrito que genera una proteína sin actividad reverso transcriptasa. El
segundo mutante tiene cambiada una cisteína (la C876) a Alanina. Cisteína muy
conservada en todas las enzimas nitrilasas estudiadas y que tiene importantes
consecuencias en la actividad Nitrilasa.
Paco nos
enseñó mediante un programa lector del ADN cómo se habían generado esas
mutaciones.
Ya estamos en condiciones de entender hacia donde nos dirigimos y qué
podremos esperar de nuestros próximos experimentos!!!
Aupa Equipo!!!
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